端粒酶检测是指对细胞或组织样本中端粒酶活性及相关组分进行检验分析,为肿瘤研究、细胞生物学研究和临床科研提供数据依据。
端粒酶是维持端粒长度的关键酶,其活性水平反映细胞永生化能力,TERT 表达、TERC组分是酶活性的分子基础,而端粒长度与细胞衰老相关。规范检测是端粒酶研究准确可靠的基础。
样品类型:细胞样本、组织样本
检测目标:端粒酶活性、端粒酶组分、端粒长度
应用:肿瘤研究、细胞生物学、抗衰老研究
端粒酶活性:TRAP 法(端粒重复序列扩增法)
端粒酶活性定量:ddTRAP(微滴数字 PCR)
实时荧光定量 TRAP(Q-TRAP)
端粒酶逆转录酶(TERT)表达
端粒酶 RNA 组分(TERC)
端粒长度测定
端粒酶阳性 / 阴性判定
六碱基梯状条带分析
ELISA 法端粒酶活性检测
TRAP 法(端粒重复序列扩增法,Kim 1994)—— 经典方法
ddTRAP(droplet digital TRAP)—— jingque定量
Q-TRAP(实时荧光定量 TRAP)—— 高通量
ELISA-TRAP—— 半定量
端粒酶检测以 TRAP 法为经典基础,通过端粒酶介导引物延伸后 PCR 扩增,产生六碱基梯状条带判定活性,ddTRAP可jingque定量。
1. TRAP 法原理是什么?端粒酶以自身 RNA 为模板在底物寡核苷酸末端添加 TTAGGG 六碱基重复序列,经 PCR扩增后电泳显示 6bp 差异的梯状条带,判定端粒酶活性。
2. ddTRAP 比传统 TRAP 好在哪里?ddTRAP 将 TRAP 与微滴数字 PCR结合,提高了灵敏度、通量和重复性,可对端粒酶活性进行juedui定量,不受 PCR 抑制剂干扰。
3. 端粒酶阳性说明什么?端粒酶在 85%~90%的肿瘤组织中呈阳性,正常体细胞一般阴性,端粒酶活性是肿瘤研究的重要标志物。
4. TERT 和 TERC 是什么?TERT(端粒酶逆转录酶)是端粒酶的催化蛋白亚基,TERC 是端粒酶的 RNA模板组分,两者共同构成有活性的端粒酶复合物。
5. 端粒酶检测样品有什么要求?需新鲜或妥善保存的细胞 /组织样本,端粒酶对温度敏感,样本应低温处理避免酶失活,避免反复冻融。
【仪器设备】
现配有X射线荧光光谱仪(XRF)、阿贝折射仪、闭口闪点自动测定仪、红外光谱仪(IR)、火焰光度计、快速溶剂萃取仪、电感耦合等离子体光谱仪(ICP)、电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)、顶空气相色谱质谱联用仪(HS-GCMS)、捕集阱顶空-气质联用仪(PT-GCMS)、恒温恒湿系统、离子色谱仪(IC)、气相色谱仪(GC)、气相色谱质谱联用仪(GCMS)、气相色谱质谱联用仪(热裂解)GC-MS(PY)、热脱附-GCMS、示波极谱仪等、天平、微波消解仪、显微红外光谱仪(FT-IR)、显微镜、旋转蒸发仪、液相色谱串联质谱联用仪(LC-MS)、紫外可见分光光度计(UV)、液相色谱仪、原子荧光(AFS)、荧光白度计、原子吸收光谱(AAS)。
【资质证书】
已获得检验检测机构资质认定证书(CMA资质证书)、中国合格评定国家认可委员会实验室认可证书(CNAS资质证书)、农产品质量安全检测机构考核合格证书(CATL资质证书)、质量管理体系、环境管理体系、职业健康安全管理体系认证证书等资质证书。直属机构安徽清析司法鉴定所获批颁发的司法鉴定许可证、并通过司法鉴定科学研究院34项能力验证。
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我院每年出具超过20000份报告,累计服务客户45000多家,客户类型包含公司单位、高校及科研院所、500强企业、跨国公司等。
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