百泰派克生物科技BTP客户案例:利用Edman降解测序鉴定重......-国产思思99re99在线观看,午夜伦理伦理片在线观メイリン モデルコレクション メ
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期刊:Biomolecules;影响因子:6.1910
原文链接:DOI: 10.3390/ biom11111552
研究对象:一种新的激素敏感脂肪酶Est19
研究目的:对新的Est19进行表征
研究手段:蛋白质组学测序等
研究内容及结论:酯酶是一类重要的酶,具有广泛的工业应用。从南极假单胞菌中分离到一个新的激素敏感脂肪酶(HSL)家族,Est19。对E2-15进行鉴定、克隆和表达。该酶具有一个含有活性丝氨酸(S)的GESAG基序,位于高度保守的催化三联体Ser155、Asp253和His282残基中。在40℃下,Est19对pNPC6底物的催化效率(kcat/kM)为148.68s−1 mM−1。用天冬氨酸取代与关键催化丝氨酸并列的Glu154(E154→D)后,该酶的活性和催化效率降低了两倍,底物亲和度变化不大。野生型酶在10-60℃的温度范围内保持接近完全活性,而在0℃下保持约50%的活性。系统发育分析表明,Est19及其同源基因可能代表了HSL的一个新的亚家族。这种热稳定性和立体特异性表明,Est19酯酶可能在冷催化和手性催化中有应用价值。
利用Edman降解测序鉴定重组Est19基因的表达蛋白,该服务由北京百泰派克生物科技提供。SDS-PAGE结果显示,其分子量为~35kDa,与理论分子量一致。Edman降解N-末端测序表明,在大肠杆菌中表达时没有dìyī个氨基酸残基Met1。
Liu X, Zhou M, Xing S, et al. Identification and biochemicalcharacterization of a novel hormone-sensitive lipase familyesterase Est19 from the Antarctic bacterium Pseudomonas sp.E2-15[J]. Biomolecules, 2021, 11(11): 1552.
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd.简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系,zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务,业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台,服务3000+企业,10000+客户的选择,致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!
基于Edman降解的蛋白N端序列分析
(1)基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统,为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航,包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
(2)基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用,Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo ScientificExploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段,包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
(3)生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪,氢气交换质谱仪配备机械臂,为生物药物表征提供了全面的分析手段,包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
(4)基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10xGenomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
(5)基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single CellAnalysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
(6)基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台,能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
(7)生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台,能够完成一整套的生物信息学解决方案,包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
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